杂质增长明显被CDE发补，解释了两次

王中泰

杂质增长明显被CDE发补，解释了两次

CDE：请提供1.0g加速6月有关物质结果，将其和0.25g加速6月试验结果放同一表格，并对二者杂质的增长趋势情况作适当总结
背景：一个增加规格的项目发补，0.25g是增加规格，1.0g是获批规格

第一次解释
杂质对比见下表

由上表可知，0.25g杂质R和最大单杂的含量高于1.0g的

关于杂质R
杂质R为水解产物，0.25g的水分明显高于1.0g，这是0.25g杂质R含量高于1.0g的主要原因
关于最大单杂
0.25g最大单杂为RRT0.83，1.0g最大单杂为RRT1.16。其中RRT0.83是0.5g和1.0g的共同杂质，为高温降解杂质

如低规格的杂质含量大于高规格的，为什么一文处理数据，见下表，0.25g “瓶内空气体积/理论装量”明显高于1.0g的，即0.25g的氧气较1.0g的相对丰富，而0.25g的水分高于1.0g的，这两个因素可能是0.25g的 RRT0.83未知杂质（最大单杂）增长趋势高于1.0g的原因

CDE不认同最大单杂的解释
猜测原因是最大单杂的含量高于鉴定限（鉴定限为0.10%）

第二次解释
0.25g最大单杂为RRT0.83，1.0g最大单杂为RRT1.16
0.25g的最大单杂高于1.0g的原因是RRT0.83未知杂质与杂质R分离效果不佳，而采用“垂直”积分方式使0.25g的RRT0.83未知杂质的峰面积明显积大了，垂直积分与切线撇去思路不合适本例

分离不佳影响准确性，对有关物质分析方法进行优化为：

1、因流动相中磷酸盐缓冲液的浓度较高，在梯度洗脱中存在盐析会缩短色谱柱寿命，故把盐浓度降低一半

2、梯度的初始比例为高纯水会使色谱柱的填料流失，故把初始梯度比例调整为初始梯度的有机相比例由1%调整至5%

杂质R与其相邻的未知杂质达基线分离，见下图

优化后方法，各已知杂质分离度满足要求，出峰顺序没有改变，与优化前方法同步检测3批样品的结果基本一致，表明专属性和准确性满足要求（言外之意：优化后方法无需验证，只需对比3批样品的检测结果）

用优化后方法检测两个规格的长18月样品，最大单杂的含量相当（RRT也一致）

在批件里，CDE接收原分析方法但要求稳定性继续关注最大单杂的变化趋势