甘露醇卵黄培养基基础原理和使用方法

一、试验原理：

  用于分离培养病原性金黄SE葡萄球菌。

  蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；D—甘露醇为可发酵糖类；7.5%浓度氯化钠可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生长；琼脂是培养基的凝固剂；酚红为pH指示剂，金黄SE葡萄球菌可分解培养基中的甘露醇产酸，使菌落周围变黄，并能降解卵黄中的卵磷脂使菌落产生晕圈。

二、培养基配方（g/L）：

三、试验方法：

  粉体装培养基的使用：

  1. 称取本品112.5g，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中，煮沸1分钟，121℃高压灭菌15分钟，待培养基冷却至45-50℃时，无菌操作，加入50%卵黄乳液30ml，摇匀，倾入无菌平皿，备用。

  2. 制备质控菌液。

  3. 选择合适稀释度的质控菌液0.1ml，均匀涂布于平板上，每一稀释度接种两个平板。用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环，将接种环接触容器边缘3次去除多余液体，在平板表面划六条平行直线，同时接种两个平板。

  4. 36±1℃需氧培养24-48小时，记录实验结果。

四、结果观察与解释

  接种以下质控菌株，36±1℃需氧培养24-48小时：

质控菌株菌株编号接种量(CFU)参比或计数培养基方法质控评定标准其他特征大肠埃希氏菌ATCC25922//半定量G≤1/伤寒SHA门氏菌ATCC14028//G≤1/金黄SE葡萄球菌ATCC653820-200TSA定量PR≥0.7黄色菌落，菌落周围有晕圈金黄SE葡萄球菌ATCC2592320-200PR≥0.7黄色菌落，菌落周围有晕圈表皮葡萄球菌CMCC(B)2606920-200PR≥0.7红色菌落，没有晕圈

五、注意事项：

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。

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