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常用的电泳缓冲液
2005-11-18  
































































缓冲液


使用液


浓贮存液(每升)


tris-乙酸(tae)


1×:0.04mol/l tris-乙酸


50×:242g tris碱

 

0.001mol/l edta


57.1ml冰乙酸

   

100ml 0.5mol/l edta(ph8.0)


tris-磷酸(tpe)


1×:0.09mol/l tris-磷酸


10×:10g tris碱

 

0.002mol/l edta


15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)

   

40ml 0.5mol/l edta(ph8.0)


tris-硼酸(tbe)a


0.5×0.045mol/l tris-硼酸


5×:54g tris碱

 

0.001mol/l edta


27.5硼酸

   

20ml 0.5mol/l edta(ph8.0)


碱性缓冲液b


1×:50mmol/l naoh


1×:5ml 10mol/l naoh

 

1mmol/l edta


2ml 0.5mmol/l edta(ph8.0)


tris-甘氨酸c


1×:25mmol/l tris


5×:15.1g tris

 

250mmol/l 甘氨酸


94g 苷氨酸(电泳级)(ph8.3)

 

0.1% sds


50ml 10% sds(电泳级)


说明:


①tbe溶液长时间存放后会形成沉淀物,为避免这一问题,可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液,出现沉淀后则予以废弃。


以片都以1×tbe作为使用液(即1:5稀释浓贮液)进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1:10稀释的贮存液作为使用液。


进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小, 故通过缓冲液的电流量通常较大,需要使用1×tbe以提供足够的缓冲容量。


②碱性电泳缓冲液应现用现配。


③tris-甘氨酸缓冲液用sds聚丙烯酰胺凝胶电泳。


2×sds凝胶加样缓冲液:


100mmol/l tris・hcl(6.8)


200mmol/l二硫苏糖醇(dtt)


4%sds(电泳级)


0.2%溴酚蓝


20%甘油


不含dtt的2×sds凝胶加样缓冲液可保存于室温,应在临用前取1mol/l贮存液现加于上述缓冲液中。

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