近日,中国水产科学研究院北戴河中心实验站牙鲆遗传育种创新团队在鲆鲽鱼类套式病毒(Chinook salmon bafinivirus,CSBV)快速检测研究上取得新进展,首次利用环介导等温扩增技术(LAMP)建立了一种现场快速检测CSBV的方法。相关研究成果以“Rapid and specific detection of Chinook salmon bafinivirus (CSBV) in flatfish using loop-mediated isothermal amplification (LAMP)”为题发表于《Aquaculture International》(JCR 1区期刊,IF: 2.9,全文网址为:https://doi.org/10.1007/s10499-023-01285-3)。
CSBV是引起鲆鲽鱼类“出血症”主要病原体之一,其引起鲆鲽鱼类底板出血、烂鳍烂尾、肝脏出血等症状,并导致大量死亡。该病毒属于套式病毒目(Nidovirales),托巴套氏病毒科(Tobaniviridae),Oncotshavirus属,对于易感的鲆鲽鱼类,致死率可高达70%以上。北戴河站分别于2019年和2022年在河北省以及辽宁省分离得到CSBV的两株新毒株,分别命名为:CSBV Bces-Po19(牙鲆分离株),CSBV Bces-Sm22(大菱鲆分离株)。截至目前,该病毒扩散到辽宁省、河北省的多个鲆鲽鱼类养殖场,对鲆鲽鱼类养殖产业造成了严重影响,成为了制约产业健康发展的重大瓶颈。
为了弥补现有CSBV检测方法操作复杂、对于设备要求高的问题,研究团队基于LAMP技术建立的快速检测方法,可以通过一小时内的恒温扩增就能通过肉眼观察颜色变化来得到实验结果,完成检测;并且还可通过琼脂糖凝胶电泳进行再次验证。结果表明,在65℃恒温扩增1h后,检出限低至10 pg/μL。该方法在具备操作简单、对于设备要求低等优点的同时,更加具备扩增特异性高,灵敏度高的优势。
上述研究得到中国水产科学研究院基本科研业务费(2023TD41),河北省重点研发计划(21326307D)以及国家海水鱼产业技术体系(CARS-47)等项目的资助。