从小白开始学色谱之液相色谱简单操作

王中泰 · 发表于 2024-8-18 17:19

从小白开始学色谱之液相色谱简单操作

最近有多个网友私信提出想学习液相色谱的操作，我这里简单介绍一下。由于各个厂商的液相设备及软件系统操作差异较大，我就不逐一介绍了，下面以安捷伦的液相系统操作举例。

我们液相色谱方法内容包括：色谱柱的种类及规格，流动相，波长，流速，进样量，柱温，梯度或等度条件。

首先，我们先找到要用的色谱柱，配置好流动相。

然后，将液相输液管路的吸滤头放进流动相中，打开Purge阀，点开主界面右下方“启动”，点开②泵界面，流速设置为4ml/min，置换流动相，大约3min即可。将流速设置为1ml/min（常规4.6mm内径色谱柱流速一般为1ml/min），将柱温箱内的管路连接色谱柱，拧紧Purge阀，这时观察下面②处柱压逐渐升高。

后面开始建立仪器方法：点开①处，设置进样量。

点开主界面②处泵的设置：设置流速；A相和B相的初始比例；每一针的运行时长；设置梯度或者等度。

点开主界面③处柱温设置

点开主界面④处检测器设置：

此系统配置的是DAD检测器，可以设置多波长；可以采集全波长的光谱数据。

仪器方法建立后，方法另存，命名。

下面建立序列：打开序列参数，设置数据存储目录；在②处是设置开启新方法后的等待时间，也就是平衡色谱柱的时间；③处是设置序列结束后的操作命令：

1）standby（待机，关闭泵、柱温箱、灯），

2）lamp all off（仅关灯），

3）pump all off（仅关泵）。