同一个梯度的两个平板为什么都有一个菌落蔓延

Ohsawoo · 发表于 2024-8-1 10:32

请问各位老师就是我现在做菌落总数，几乎每次都会蔓延，一直在论坛里面找原因，排查了挺多原因的，就是找不到结论，有时候覆盖了一次的平板也还是会蔓延，培养基都是放在水浴锅里面，温度也不高，培养基都是加热溶解再灭菌20min（因为开始灭菌15min也还是菌落蔓延，以为是培养基灭菌不彻底，所以灭菌20min）。这次做的三个梯度，两个平板平均的都有一个平板蔓延，我真的都搞不清楚菌落蔓延的原因了。
题外话：各位老师我还想问一下，空白平板蔓延的原因有哪些，有次到平板打开的盖子凝固的空白平板没有蔓延，但是关上盖子的空白平板缺蔓延了，然后只加了培养基的空白平板也蔓延了（实验室培养基用的是环凯，而且灭菌20min）

求各位大神、各位老师的帮助解答

不想吃椰子鸡了 · 发表于 2024-8-1 10:50

蹲一个，我们之前好像也遇见过，但是没查出来原因

justsoso333 · 发表于 2024-8-1 10:51

无菌室和超净工作台的空气沉降如何，培养基或培养皿灭菌不彻底

2323889183 · 发表于 2024-8-1 11:01

我今天有个培养基也出现了菌落蔓延，关键是夹在中间的，搞不清楚，反正不是空白，直接就当一个了

；像你这种最上层的不一定是培养箱的问题，多排查几次，比如做完后放培养箱之前换个位置；看看是第一个接种；第一个倒板；或者是最后一个，哪个出的问题。放置放置时间过久；中间哪个步骤停留过久；培养皿干燥情况，没太多经验我只有些笨办法。我记得我以前好像看到过一个相关文档，找不到了，你可以找找，关于菌落蔓延的，一个是待测物性质需要表层再覆盖一层5mm的培养基，你这种肯定不是；另一方面是加入稀释液后间隔太久加培养基；还有一种情况是加入培养基后冷却时间太久，表面冷却水晕开，也就是培养皿水分太多吗，不知道说的准不准确，可以尝试去找一下这个相关文档。

RoseZi · 发表于 2024-8-1 11:07

培养皿灭菌方法用的湿式的有可能会导致菌落蔓延

阿加西 · 发表于 2024-8-1 13:50

空白蔓延是咋回事？

wswjcy_04 · 发表于 2024-8-1 14:22

本帖最后由 wswjcy_04 于 2024-8-1 14:29 编辑

1、空白蔓延就说明是你操作不规范染菌了啊。 2、查一下是不是染菌了：拿商用一次性同样培养基两个空白堆叠试试。 3、查一下是不是菌落本身就是这么大：将蔓延的菌落划线到相同培养基平板上分离成单个菌落看看是不是菌落本身就是很大。查一下是不是培养箱导致的：换另一台培养箱试试 4、查一下是不是操作过程导致蔓延：挑你培养皿中没有蔓延的菌落划线到相同培养基上（在培养基上划几个杠即刻，不是划线分离），培养出来后挑取菌泥到生理盐水中制成一定浓度菌悬液，然后把菌悬液当成样品，按你之前检测的步骤操作，如果还出现同样的情况，那肯定是操作过程导致，再换另一个实验员试试。 5、查一下是不是堆叠造成的：同一稀释度两个平放